大家知道叶绿素是植物光合作用的重要光合色素,但大多数人不知道叶绿素有a、b、c、d四种类型,其中叶绿素a是一种能将光合作用的光能传递给化学反应系统的唯一色素,通过测定叶绿素a,可掌握水体的初级生产力,了解河流、湖泊和海洋中浮游植物的现存量。试验表明,当叶绿素a质量浓度升至10 mg/m3以上并有迅速增加的趋势时,就可以预测水体即将发生富营养化。因此,可将叶绿素a含量作为评价水体富营养化并预测其发展趋势的指标之一。
叶绿素a浓度测定实验过程
1、水样采集与保存
水样的采集一般使用有机玻璃采水器或其他适当的采样器采集水面下0.5m水样,湖泊、水库根据需要可进行分层采样或混合采样,采样体积为1L或500ml。
2、制备水样
在过滤装置上装好玻璃纤维滤膜。根据水体的营养状态确定取样体积,具体可以参考过滤水样体积,用量筒量取一定体积的混匀水样,进行过滤,最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。
3、研磨
将样品滤膜放置于多样品组织研磨仪装置中,加入3ml-4ml丙酮溶液,研磨至糊状。补加3ml-4ml丙酮溶液,继续研磨,并重复1-2次,保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中,用丙酮溶液冲洗研钵及研磨杵,一并转入离心管中,定容至10ml。
4、浸泡提取
将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后,用铝箔包好,放置于4℃避光浸泡提取2h以上,不超过24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀2-3 次。
5、离心
将离心管放入离心机,以相对离心力1000×g(转速 3000 r/min~4000 r/min)离心10min。然后用针式滤器过滤上清液得到叶绿素a的丙酮提取液(试样)待测。
6、水样测定
将试样移至比色皿中,以丙酮溶液为参比溶液,于波长750nm、664nm、647nm、630nm处测量吸光度。750nm波长处的吸光度应小于0.005,否则需重新用针式滤器过滤后测定。最后水样中叶绿素a的质量浓度可以按照相应公式进行计算得出。
在以上叶绿素a浓度测定实验中大家就用到了多样品组织研磨仪了,相比于人工研磨,组织研磨仪的效率是比较高的,一批次可以出多个样品,多样品组织研磨仪配备2ml制冷适配器一套, 10ml钢罐及适配器一套,一次可同时研磨24个样品,无交叉污染。而且研磨时间快,可在2秒内达到最大速度或最低速度。